Nectin4-zielgerichtete VHH-CAR-T-Zellen zeigen Potenz gegen Blasenkrebs

Ankündigung einer neuen Artikelveröffentlichung für Bio -Integration Zeitschrift. Blasenkrebs (BLCA) ist eine der häufigsten malignen Erkrankungen und der zweithäufigste Urogenitaltrakt -Tumor. Die Zell- und Gentherapie, die bei der Behandlung von BLCA viele Vorteile bieten, sind dringend erforderlich. Es gibt jedoch eine wichtige Einschränkung des derzeit gemeldeten Einzelkette -Antikörpers als chimärer Antigenrezeptor -Targeting -Domäne. Insbesondere führt die Autoaggregation zu einer CAR-T-Depletion, die aus dem Linkerpeptid und der Faltungsstabilität zwischen den variablen Domänen (VH und VL) des Einzelkettenantikörpers des Autos stammen kann. Humanisierte, kleine Größe, starke Affinität Einzeldomänenantikörper (variable Domäne der schweren Kette von Schwerketten-Antikörpern [VHH]) Abgeleitet von Kameliden sind vielversprechende Alternativen.

Die nectin4-zielgerichteten VHH-CAR-T-Zellen der zweiten Generation wurden konstruiert und die spezifische Abtötungswirksamkeit gegen BLCA-Zellen bestimmt in vitro. VHH-Nectin4-Car-Lentivirus wurde in menschliche T-Zellen transduziert und CAR-T-Zellphänotypen wurden durch Durchflusszytometrie analysiert. Die Wirksamkeit von Zellenabtötungen wurde unter Verwendung von Nectin4-positiven BLCA-Zellen (SW780 und RT4) und Nectin4-negativem U87-Mg-Zellen als Kontrollen unter Verwendung des Xcelligence-Echtzeit-Zellanalysesystems bewertet. Die Expression der Zytokinsekretion (IFN-γ und IL-2) wurde durch einen enzymgebundenen immunosorbenten Assay gemessen.

Vhhnectin4-Car Lentivirus-Behandlung erhöhte den Anteil der CD4+ T- und Gedächtnis-T-Zellen. VHHNECTIN4-CAR-T-Zellen hatten im Vergleich zur Kontrolle mit VH-VL-basierten CAR-T-Zellen, spezifisch erkannte Nectin4+ BLCA-Zellen, sekretierte Zytokine und vermittelte Zellapoptose, eine erhöhte spezifische Abtötungsfähigkeit. Darüber hinaus hatte Vhhnectin4-CAR-T keinen Einfluss auf das Zellwachstum von Nectin4-U87-mg.
VHHNECTIN4-CAR-T-Zellen wurden mit potenter Abtötungsfähigkeit hergestellt, die speziell Nectin4+ BLCA-Zellen erkannten in vitro.

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