A Nectin4-célzott VHH CAR T-sejtek hatékonyak a hólyagrák ellen

A Nectin4-célzott VHH CAR T-sejtek hatékonyak a hólyagrák ellen

Új cikk megjelenését hirdetjük meg a számáraSzerves integrációMagazin. A hólyagrák (BLCA) az egyik leggyakoribb rosszindulatú daganat, és a második leggyakoribb húgyúti daganat. Sürgősen szükség van sejt- és génterápiára, amely számos előnnyel jár a BLCA kezelésében. A jelenleg bejelentett egyláncú antitest kiméra antigénreceptor célzódoménjének azonban van egy fontos korlátja. Pontosabban, az autoaggregáció a CAR-T kimerülését eredményezi, amely a linker peptidből és az auto egyláncú antitest variábilis doménjei (VH és VL) közötti feltekeredési stabilitásból eredhet. A tevefélékből származó humanizált, kis méretű, erős affinitású egydoménes antitestek (variábilis domén nehézlánc antitestek [VHH]) ígéretes alternatívák.

A második generációs nektin4 célzott VHH-CAR-T sejteket megszerkesztettük, és meghatároztuk a BLCA sejtek elleni specifikus pusztító hatást.in vitro. A VHH-Nectin4-Car lentivírust humán T-sejtekbe transzdukáltuk, és a CAR T-sejtek fenotípusait áramlási citometriával elemeztük. A sejtpusztító hatékonyságot Nectin4-pozitív BLCA-sejtek (SW780 és RT4) és Nectin4-negatív U87-Mg-sejtek felhasználásával értékeltük kontrollként az Xcelligence valós idejű sejtelemző rendszer segítségével. A citokin szekréció (IFN-γ és IL-2) expresszióját enzimhez kötött immunszorbens assay-vel mértük.

A Vhhnectin4-Car lentivírus kezelés növelte a CD4+ T és a memória T sejtek arányát. A VHHNECTIN4-CAR-T sejtek specifikus ölőképessége megnövekedett a VH-VL alapú CAR-T sejtekkel összehasonlítva, a specifikusan felismert Nectin4+ BLCA sejtek, a szekretált citokinek és a közvetített sejt apoptózis. Ezenkívül a Vhhnectin4-CAR-T nem volt hatással a Nectin4-U87 mg sejtnövekedésre.
A VHHNECTIN4-CAR-T sejtek erős ölőképességgel készültek, amelyek specifikusan felismerték a Nectin4+ BLCA sejteketin vitro.

Források: