Quelle influence le SRAS-CoV-2 a-t-il sur le pouvoir infectieux du VIH-1 ?

Quelle influence le SRAS-CoV-2 a-t-il sur le pouvoir infectieux du VIH-1 ?

Dans une étude récemment publiée Lieu de recherche * Serveur de pré-impression : Les chercheurs ont examiné l'effet du coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère (SRAS-CoV-2) et des protéines d'enveloppe du SRAS-CoV (E) sur le pouvoir infectieux du virus de l'immunodéficience humaine de type 1 (VIH-1).

Studie: Die Hüllproteine ​​von SARS-CoV-2 und SARS-CoV reduzieren wirksam die Infektiosität des Humanen Immundefizienzvirus Typ 1 (HIV-1). Bildnachweis: RAJ CREATIONZS/Shutterstock

Cet article de presse était une revue d'un rapport scientifique préliminaire qui n'avait pas été évalué par des pairs au moment de la publication. Depuis sa publication initiale, le rapport scientifique a été évalué par des pairs et accepté pour publication dans une revue universitaire. Des liens vers les rapports préliminaires et évalués par des pairs se trouvent dans la section Sources à la fin de cet article. Afficher les sources

Les canaux ioniques codés par les virus sont appelés viroporines et sont impliqués dans la formation et la libération des virus. Le virus de la grippe A et le VIH-1 codent pour les viroporines. Le SRAS-CoV-2 code pour au moins deux viroporines : la protéine d'enveloppe (E) et le cadre de lecture ouvert (ORF)-3a. En termes de taille, de position dans la membrane, d’activité des canaux ioniques et de rôle dans la libération du virus, les protéines CoV-E sont similaires à la protéine virale U (Vpu) du VIH-1. Sur la base de ces similitudes, l’équipe a déterminé les propriétés biologiques de la protéine SARS-CoV-2 E par rapport au VIH-1 pour évaluer si elle pourrait remplacer le VIH-1 Vpu.

À propos de l'étude

Dans la présente étude, les chercheurs ont examiné la réplication du VIH-1 en présence de protéines du bêta-coronavirus E.

L’équipe a d’abord examiné l’expression intracellulaire de la protéine SARS-CoV-2 E. La protéine SARS-CoV-2 E a été exprimée dans des cellules COS-7 à l’aide d’un vecteur marqué à l’extrémité C avec une étiquette hémagglutinine (HA). La protéine E a ensuite été immunocolorée avec des anticorps anti-HA ainsi que des anticorps contre LAMP-1 (endosomes/lysosomes tardifs), le compartiment intermédiaire du réticulum endoplasmique (ER)-Golgi (ERGIC53) et Golgin97 (trans-Golgi). L’équipe a ensuite co-transfecté des cellules avec des plasmides exprimant la protéine E-HA et des vecteurs exprimant ER-MoxGFP (RER), TGN38-GFP (TGN) ou Giantin-GFP (cis/Golgi médial) pour examiner la colocalisation de la protéine E et du Golgi ER, TGN et cis-médian. Dans ces cotransfections, des cellules ont été fixées, perméabilisées et immunocolorées avec un anticorps anti-HA pour détecter la protéine E.

De plus, l’équipe a comparé la localisation intracellulaire du SRAS-CoV-2 E avec les protéines du SRAS-CoV, du syndrome respiratoire du Moyen-Orient (MERS)-CoV et du HCoV-OC43 E. Ils ont ensuite testé la quantité de VIH-1 infectieux ou de vpuHIV-1 produite pour déterminer si la protéine SARS-CoV-2 E augmenterait ou diminuerait la quantité. Le vecteur vide pcDNA3.1(+), qui codait pour la protéine E du SRAS-CoV-2, la glycoprotéine D (gD) du virus de l'herpès simplex de type 1 (HSV-1), qui était un contrôle positif pour la restriction, ou gD[TMCT] qui était sécrétée par les cellules et ne limitait pas le VIH-1, et pNL4-3 étaient tous présents dans les cellules HEK293 ont été cotransfectés.

Résultats

Les résultats de l’étude ont montré que les marqueurs de Golgi ER, ERGIC, TGN, trans-Golgi et cis-médian étaient co-localisés avec la protéine E. Cependant, ni la membrane plasmique cellulaire ni les lysosomes ne possédaient la protéine E. Cela suggère que les trois protéines E étaient localisées dans la cellule, semblable à la protéine E du SRAS-CoV-2. La présence de la protéine SARS-CoV-2 E a considérablement réduit la quantité de VIH-1 infectieux libérée. Les protéines SARS-CoV-2 E et gD présentes dans les lysats cellulaires étaient bien exprimées lors des co-transfections, comme en témoignent les immunoblots. De plus, l’équipe a découvert qu’en l’absence de la protéine Vpu, la protéine Bone Marrow Stroma Cell Antigen 2 (BST-2) réduisait la quantité de VIH-1.

L'équipe a observé que la co-transfection avec des vecteurs codant pour le génome vpu HIV-1, BST-2 et la protéine SARS-CoV-2 E réduisait la production du virus infectieux, mais pas de manière aussi significative que la protéine HSV-1 gD. Les immunoblots des lysats cellulaires pour gD, BST-2 et la protéine SARS-CoV-2 E ont montré que ces protéines présentaient une expression significative au cours des co-transfections. Dans l’ensemble, l’équipe a constaté que la protéine E du SRAS-CoV-2 empêchait la croissance des deux virus et ne pouvait pas remplacer la fonction de la protéine Vpu.

L’examen de l’expression intracellulaire de ces protéines E a révélé que, comme la protéine E du SARS-CoV-2, elles étaient localisées exclusivement dans les parties ER et Golgi de la cellule, sans montrer aucune expression à la surface cellulaire. Bien que la gD soit présente, elle n’a eu aucun effet sur la quantité de VIH-1 infectieux libérée. Au lieu de cela, la publication a été restreinte. Les protéines E liées au SRAS-CoV-2 et au SRAS-CoV ont réduit de manière significative la quantité de VIH-1 infectieux libérée de 1,3 % et 1,4 %, respectivement. Moins de restriction a été observée pour les protéines MERS-CoV et HCoV-OC43 E dans près de 37 % et 16 % du contrôle pcDNA3.1(+), respectivement.

Les protéines SARS-CoV-2 et MERS-CoV-E partageaient environ 37 % de leurs séquences d’acides aminés, tandis que les protéines SARS-CoV-2 et HCoV-OC43-E en partageaient environ 26 %. L'expression des protéines gD et E a été vérifiée par immunoprécipitation à partir de lysats cellulaires issus des tests de restriction. Ces résultats fournissent des informations supplémentaires sur la spécificité de la restriction du VIH-1.

Dans l’ensemble, les résultats de l’étude ont démontré la capacité des protéines SARS-CoV-2 et SARS-CoV-E à prévenir de manière significative le développement d’une infection infectieuse par le VIH-1. L’étude a révélé que la synthèse des protéines était très probablement inhibée et que l’apoptose était déclenchée par l’expression de la protéine SARS-CoV-2 E. Ces résultats ont prouvé qu’une viroporine provenant d’un virus peut empêcher un autre virus d’infecter les cellules.

Cet article de presse était une revue d'un rapport scientifique préliminaire qui n'avait pas été évalué par des pairs au moment de la publication. Depuis sa publication initiale, le rapport scientifique a été évalué par des pairs et accepté pour publication dans une revue universitaire. Des liens vers les rapports préliminaires et évalués par des pairs se trouvent dans la section Sources à la fin de cet article. Afficher les sources

Références :

• Vorläufiger wissenschaftlicher Bericht.
  Wyatt Henke, Hope Waisner, Sachith Polpitiya Arachchige, Maria Kalamvoki, Edward Stephens. (2022). Die Hüllproteine ​​von SARS-CoV-2 und SARS-CoV reduzieren wirksam die Infektiosität des Humanen Immundefizienzvirus Typ 1 (HIV-1). Forschungsplatz. doi: https://doi.org/10.21203/rs.3.rs-2175808/v1 https://www.researchsquare.com/article/rs-2175808/v1
• Von Experten begutachteter und veröffentlichter wissenschaftlicher Bericht.
  Henke, Wyatt, Hope Waisner, Sachith Polpitiya Arachchige, Maria Kalamvoki und Edward Stephens. 2022. „Die Hüllproteine ​​von SARS-CoV-2 und SARS-CoV reduzieren wirksam die Infektiosität des Humanen Immundefizienzvirus Typ 1 (HIV-1).“ Retrovirologie 19 (1). https://doi.org/10.1186/s12977-022-00611-6. https://retrovirology.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12977-022-00611-6.

Révisions d'articles

• 16. Mai 2023 – Das vorab gedruckte vorläufige Forschungspapier, auf dem dieser Artikel basiert, wurde zur Veröffentlichung in einer von Experten begutachteten wissenschaftlichen Zeitschrift angenommen. Dieser Artikel wurde entsprechend bearbeitet und enthält nun einen Link zum endgültigen, von Experten begutachteten Artikel, der jetzt im Abschnitt „Quellen“ angezeigt wird.