Η μόλυνση από τον ιό της ευλογιάς των πιθήκων και η εμμονή της στους όρχεις μολυσμένων μακάκων που τρώνε καβούρι

Η μόλυνση από τον ιό της ευλογιάς των πιθήκων και η εμμονή της στους όρχεις μολυσμένων μακάκων που τρώνε καβούρι

Σε πρόσφατη μελέτη που δημοσιεύτηκε στο Φυσική μικροβιολογία Οι ερευνητές διεξήγαγαν μια αναδρομική ανίχνευση του ιού της ευλογιάς των πιθήκων (MPXV) στους όρχεις πρωτευόντων πλην του ανθρώπου (NHPs).

Lernen: Retrospektiver Nachweis des Affenpockenvirus in den Hoden nichtmenschlicher Primatenüberlebender. Bildnachweis: BalazsSebok/Shutterstock

φόντο

Η στενή σεξουαλική επαφή έχει συνδεθεί με την εξάπλωση του MPXV στην παγκόσμια πανδημία του 2022. Ωστόσο, δεν είναι ακόμη σαφές εάν το MPXV αναπαράγεται στους όρχεις ή μεταδίδεται μέσω του σπέρματος και οδηγεί σε ενεργή μόλυνση. Η ομάδα εξέτασε αναδρομικά μακάκους που τρώνε καβούρι μολυσμένους με clade I MPXV ή clade II MPXV χρησιμοποιώντας ανοσοχρώση και υβριδισμό ριβονουκλεϊκού οξέος (RNA) in situ.

Σχετικά με τη μελέτη

Στην παρούσα μελέτη, οι ερευνητές εξέτασαν τη μόλυνση με MPXV και την εμμονή της στους όρχεις μολυσμένων μακάκων που τρώνε καβούρι, συμπεριλαμβανομένων των μακάκων που θεραπεύτηκαν με MPXV.

Οι μακάκοι που τρώνε καβούρι μολύνθηκαν με MPXV στο ινστιτούτο της ομάδας χρησιμοποιήθηκαν για τη μελέτη της παθογένεσης του ανθρώπινου MPVX ή ως υποκατάστατο ζωικού μοντέλου για τη μελέτη της ευλογιάς. Η λοίμωξη με MPXV ανιχνεύθηκε με διαλογή ορχικού, προστάτη και επιδιδυμικού ιστού με φορμαλίνη, ενσωματωμένο σε παραφίνη (FFPE) από 21 αρσενικούς μακάκους που έτρωγαν καβούρι που πέθαναν μέσα σε έξι έως 13 ημέρες από την έκθεση σε MPXV μέσω των οδών εμβολιασμού IT, IV ή AS, χωρίς την επέμβαση εμβολιασμού. Αυτό διευκόλυνε την κατανόηση της πιθανότητας μόλυνσης με MPXV στους όρχεις και απέκκρισης στο σπέρμα.

Η ομάδα ανέπτυξε μια δοκιμασία RNA in situ υβριδισμού (ISH) για να αναγνωρίσει το ειδικό αντίγραφο MPXV D1L, το οποίο προκαλεί ευλογιά. Η μελέτη υπέθεσε ότι το MPXV μπορεί να παραμείνει στους όρχεις των επιζώντων NHP. Επιπλέον, εξετάστηκε ο ορχικός ιστός 20 μακάκων που τρώνε καβούρι που είχαν αντέξει την πρόκληση MPXV χωρίς ιατρική θεραπεία.

Αποτελέσματα

Η ομάδα παρατήρησε ότι 18 από τα 21 ζώα είχαν αντιγόνο MPXV στους όρχεις τους, συμπεριλαμβανομένων 14 από τα 16 ζώα με το στέλεχος κλάδου Ι MPXV και τέσσερα από τα πέντε ζώα με το στέλεχος κλάδου Ι. Σε επτά από τα 18 ζώα, η ομάδα ανίχνευσε το αντιγόνο MPXV στην επιδιδυμίδα, ενώ έξι από τα 21 ζώα είχαν αντιγόνο MPXV στους αδένες του προστάτη τους. Σε σύγκριση με μη μολυσμένο ιστό όρχεων ελέγχου, η χρώση με αντιγόνο MPXV ήταν πολυεστιακή και βρέθηκε σε μεγάλο βαθμό στον διάμεσο ιστό των όρχεων.

Είναι ενδιαφέρον ότι το αντιγόνο MPXV βρέθηκε περιστασιακά σε φλεγμονώδη κύτταρα και σπερματοζωάρια ή σε κυτταρικά υπολείμματα στους σπερματοφόρους σωληνίσκους, όπου λαμβάνουν χώρα τόσο η παραγωγή σπέρματος όσο και το ανοσοποιητικό προνόμιο. Το αντιγόνο MPXV βρέθηκε σε μεγάλο βαθμό στο επιθήλιο του πόρου και στο lamina propria της επιδιδυμίδας. Συγκεκριμένα, το αντιγόνο MPXV βρέθηκε επίσης σε εκφυλισμένο σπέρμα, κυτταρικά υπολείμματα στον αυλό του επιδιδυμικού πόρου ή φλεγμονώδη κύτταρα. Στις φλεγμονώδεις περιοχές που παρατηρήθηκαν στον προστάτη έξι από τα 21 ζώα, η ανοσοϊστοχημική χρώση (IHC) ήταν πολυεστιακή ή εστιακή.

Η ομάδα χρησιμοποίησε αντισώματα για να πραγματοποιήσει χρώση ανοσοφθορισμού της ακτίνης άλφα λείου μυός (SMA) και MPXV για να δείξει ότι αυτά τα MPXV είχαν εξαπλωθεί στον αυλό των επιδιδυμικών αγωγών και των σπερματοφόρων σωληναρίων του όρχεως, που είναι υπεύθυνα για τη δημιουργία, την ωρίμανση και τη μεταφορά του σπέρματος. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι τα ιοσωμάτια MPX μπορεί να απελευθερωθούν στο σπέρμα κατά το οξύ στάδιο της μόλυνσης σε μακάκους που τρώνε καβούρι, αν και επιπλέον επαλήθευση απαιτεί απομόνωση του ιού από το σπέρμα.

Δύο από τους 20 επιζώντες με θετικό ορχικό ιστό που χρωματίστηκε με IHC επέζησαν μέχρι το τέλος του πειράματος και τον προγραμματισμένο θάνατό τους. Οι μακάκοι που τρώνε καβούρι που επέζησαν από την έκθεση σε MPXV εμφάνισαν τυπικά δερματικές αλλοιώσεις με κρούστα με επίπεδα ιικού δεοξυριβονουκλεϊκού οξέος (DNA) κάτω από το όριο ανίχνευσης περίπου 20 ημέρες μετά τη μόλυνση. Αυτοί οι δύο επιζώντες είχαν συχνά ψώρα και αποφλοιωμένες ή επουλωμένες δερματικές βλάβες στα πρόσωπα, τις ουρές, τα χέρια, τα πόδια και/ή την πλάτη τους.

Τα νεκρωτικά σπερματοφόρα σωληνάρια στους όρχεις των δύο επιζώντων και η νεκρωτική κεντρική περιοχή των κοκκιωμάτων ήταν οι κύριες θέσεις για την ανίχνευση σημάτων χρώσης IHC. Εκτός από τους πνεύμονες ενός επιζώντος και τον τραχειοβρογχικό λεμφαδένα και τον σκελετικό μυ του άλλου επιζώντος, το σήμα χρώσης IHC δεν παρατηρήθηκε στις δερματικές βλάβες ή στα άλλα όργανα. Επιπλέον, το MPXV-ειδικό RNA-ISH παρείχε πρόσθετες ενδείξεις μόλυνσης των κοκκιωμάτων των όρχεων. Εκτός από το σε μεγάλο βαθμό μη συνδεδεμένο με κύτταρα ιικό αντιγόνο στο νεκρωτικό κέντρο των κοκκιωμάτων, ένας μικρός αριθμός μονοκυττάρων/μακροφάγων CD68+ κοντά στις νεκρωτικές περιοχές περιείχε επίσης ιικό αντιγόνο.

Τα νεκρωτικά έμπλαστρα περιβάλλονταν επίσης από λεμφοκυτταρική, πλασματοκυτταρική και ουδετερόφιλη φλεγμονή, όπως αποδεικνύεται από την αφθονία CD68+ μονοκυττάρων/μακροφάγων, CD3+ Τ κυττάρων και ουδετερόφιλων μυελοϋπεροξειδάσης (MPO)+. Είναι ενδιαφέρον ότι τα CD8+ Τ κύτταρα αποτελούν την πλειοψηφία των CD3+ Τ κυττάρων. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι το MPXV μπορεί να επιμένει, ιδιαίτερα σε περιοχές φλεγμονής και νέκρωσης, στους όρχεις των επιζώντων μακάκων που τρώνε καβούρια.

«Τα δεδομένα μας παρέχουν ενδείξεις ότι ο ιός της ευλογιάς των πιθήκων μπορεί να απεκκριθεί στο σπερματικό υγρό τόσο στο οξύ όσο και στο στάδιο της ανάρρωσης της νόσου σε μακάκους που τρώνε καβούρι».

Δίπλωμα

Συνολικά, τα αποτελέσματα της μελέτης έδειξαν ότι οι μακάκοι που τρώνε καβούρι μπορούν να εκκρίνουν MPXV στο σπέρμα τους τόσο κατά το οξύ όσο και στο αναρρωτικό στάδιο της μόλυνσης.

Αναφορά:

• Liu, J., Mucker, EM, Chapman, JL et al. Retrospektiver Nachweis des Affenpockenvirus in den Hoden nichtmenschlicher Primatenüberlebender. Nat Microbiol (2022). doi: https://doi.org/10.1038/s41564-022-01259-w https://www.nature.com/articles/s41564-022-01259-w

.