Apinarokkovirusinfektio ja sen pysyvyys tartunnan saaneiden rapuja syövien makakien kiveksissä

Apinarokkovirusinfektio ja sen pysyvyys tartunnan saaneiden rapuja syövien makakien kiveksissä

Äskettäin julkaistussa tutkimuksessa Luonnollinen mikrobiologia Tutkijat suorittivat retrospektiivisen apinapoxviruksen (MPXV) havainnoinnin kädellisten (NHP:n) kiveksissä.

Lernen: Retrospektiver Nachweis des Affenpockenvirus in den Hoden nichtmenschlicher Primatenüberlebender. Bildnachweis: BalazsSebok/Shutterstock

tausta

Läheinen seksuaalinen kontakti on yhdistetty MPXV:n leviämiseen vuoden 2022 maailmanlaajuisessa pandemiassa. On kuitenkin edelleen epäselvää, replikoituuko MPXV kiveksissä vai siirtyykö se siemennesteen kautta ja johtaako se aktiiviseen infektioon. Ryhmä tutki retrospektiivisesti rapuja syöviä makakeja, jotka oli infektoitunut klade I MPXV:llä tai klade II MPXV:llä käyttämällä immunovärjäystä ja ribonukleiinihappoa (RNA) in situ -hybridisaatiota.

Tietoja tutkimuksesta

Tässä tutkimuksessa tutkijat tutkivat MPXV-infektiota ja sen pysyvyyttä tartunnan saaneiden rapuja syövien makakien kiveksissä, mukaan lukien MPXV-parannetut makakit.

Ryhmän instituutissa MPXV-tartunnan saaneita rapuja syöviä makakeja käytettiin ihmisen MPVX:n patogeneesin tutkimiseen tai korvikeeläinmallina isorokon tutkimiseen. MPXV-infektio havaittiin seulomalla formaliinilla kiinnitetty, parafiiniin upotettu (FFPE) kives-, eturauhas- ja lisäkiveskudos 21 urosrapua syövästä makakista, jotka kuolivat kuuden–13 päivän kuluessa MPXV-altistuksesta IT-, IV- tai AS-rokotereittien kautta ilman terapeuttista väliintuloa. Tämä auttoi ymmärtämään MPXV-infektion mahdollisuutta kiveksissä ja erittymistä siemennesteeseen.

Ryhmä kehitti RNA in situ hybridisaatio (ISH) -määrityksen tunnistaakseen MPXV-spesifisen transkriptin D1L, joka aiheuttaa isorokkoa. Tutkimuksessa oletettiin, että MPXV voi jäädä NHP:stä selviytyneiden kiveksiin. Lisäksi tutkittiin 20 rapua syövän makakin kiveskudosta, jotka olivat kestäneet MPXV-altistuksen ilman lääkehoitoa.

Tulokset

Ryhmä havaitsi, että 18:lla 21 eläimestä oli MPXV-antigeenia kiveksissään, mukaan lukien 14 eläimestä 16 eläimestä, joilla oli MPXV-klade I -kanta, ja neljällä viidestä eläimestä, joilla oli klade I -kanta. Seitsemässä 18 eläimestä ryhmä havaitsi MPXV-antigeenin lisäkivesisestä, kun taas kuudella 21 eläimestä oli MPXV-antigeeni eturauhasissaan. Verrattuna infektoitumattomaan kontrollikiveskudokseen, MPXV-antigeenivärjäytyminen oli multifokaalista ja sitä löydettiin suurelta osin kivesten välikudoksesta.

Mielenkiintoista on, että MPXV-antigeenia löydettiin toisinaan tulehduksellisista soluista ja siittiöistä tai siementiehyissä olevista solujätteistä, joissa tapahtuu sekä siittiöiden tuotantoa että immuunipuolustusta. MPXV-antigeenia löydettiin suurelta osin lisäkiveskanavan epiteelistä ja lamina propriasta. Erityisesti MPXV-antigeenia löydettiin myös rappeutuneista siittiöistä, solujätteistä lisäkiveskanavan ontelossa tai tulehdussoluista. Kuuden 21 eläimen eturauhasessa havaituilla tulehduksellisilla alueilla immunohistokemiallinen (IHC) värjäys oli multifokaalinen tai fokaalinen.

Tiimi käytti vasta-aineita alfa-sileälihasaktiinin (SMA) ja MPXV:n immunofluoresenssivärjäykseen osoittaakseen, että nämä MPXV:t olivat levinneet kiveksen lisäkiveksien ja siementiehyiden onteloon, jotka ovat vastuussa siittiöiden muodostumisesta, kypsymisestä ja kuljetuksesta. Nämä tulokset viittaavat siihen, että MPX-virioneja saattaa vapautua siemennesteeseen rapuja syövien makakien infektion akuutin vaiheen aikana, vaikka lisätodentaminen edellyttää viruksen eristämistä siemennesteestä.

Kaksi 20 eloonjääneestä, joilla oli positiivinen kiveskudos, joka oli värjätty IHC:llä, selvisi kokeen loppuun ja suunniteltuun kuolemaansa asti. Rapua syövillä makakeilla, jotka selvisivät MPXV-altistuksesta, ilmeni tyypillisesti kuorituneita ihovaurioita, joissa virusdeoksiribonukleiinihappo (DNA) -tasot olivat havaitsemisrajan alapuolella noin 20 päivää tartunnan jälkeen. Näillä kahdella selviytyneellä oli usein rupia ja kuoriutuneita tai parantuneita ihovaurioita kasvoissaan, hännässä, käsivarsissa, jaloissa ja/tai selässä.

Kahden eloonjääneen kiveksissä olevat nekroottiset siemenputket ja granuloomien nekroottinen keskusalue olivat tärkeimmät kohdat IHC-värjäytymissignaalien havaitsemiseksi. Lukuun ottamatta yhden eloonjääneen keuhkoja ja toisen eloonjääneen trakeobronkiaalista imusolmuketta ja luurankolihasta, IHC-värjäytymissignaalia ei havaittu ihovaurioissa tai muissa elimissä. Lisäksi MPXV-spesifinen RNA-ISH tarjosi lisätodisteita kivesten granuloomien infektiosta. Granuloomien nekroottisessa keskustassa olevan suurelta osin ei-soluun liittyvän virusantigeenin lisäksi pieni määrä CD68+-monosyyttejä/makrofageja lähellä nekroottisia alueita sisälsi myös virusantigeeniä.

Nekroottisia laastareita ympäröi myös lymfosyyttinen, plasmasyyttinen ja neutrofiilinen tulehdus, kuten CD68+-monosyyttien/makrofagien, CD3+-T-solujen ja myeloperoksidaasi (MPO)+-neutrofiilien runsaus osoittaa. Mielenkiintoista on, että CD8+ T-solut muodostavat suurimman osan CD3+ T-soluista. Nämä tulokset viittaavat siihen, että MPXV voi säilyä, erityisesti tulehdus- ja nekroosialueilla, toipuvien rapua syövien makakien kiveksissä.

"Tietomme osoittavat, että apinarokkovirus voi erittyä siemennesteeseen sekä taudin akuutissa että toipilasvaiheessa rapuja syövillä makakeilla."

Diplomi

Kaiken kaikkiaan tutkimustulokset osoittivat, että rapuja syövät makakit voivat erittää MPXV:tä siemennesteeseensä sekä infektion akuutissa että toipilasvaiheessa.

Viite:

• Liu, J., Mucker, EM, Chapman, JL et al. Retrospektiver Nachweis des Affenpockenvirus in den Hoden nichtmenschlicher Primatenüberlebender. Nat Microbiol (2022). doi: https://doi.org/10.1038/s41564-022-01259-w https://www.nature.com/articles/s41564-022-01259-w

.