Infecção pelo vírus Monkeypox e sua persistência nos testículos de macacos comedores de caranguejo infectados

Infecção pelo vírus Monkeypox e sua persistência nos testículos de macacos comedores de caranguejo infectados

Num estudo recente publicado em Microbiologia natural Os pesquisadores conduziram uma detecção retrospectiva do vírus da varíola dos macacos (MPXV) nos testículos de primatas não humanos (NHPs).

Lernen: Retrospektiver Nachweis des Affenpockenvirus in den Hoden nichtmenschlicher Primatenüberlebender. Bildnachweis: BalazsSebok/Shutterstock

fundo

O contacto sexual próximo tem sido associado à propagação do MPXV na pandemia global de 2022. No entanto, ainda não está claro se o MPXV se replica nos testículos ou se é transmitido através do sêmen e leva à infecção ativa. A equipe examinou retrospectivamente macacos comedores de caranguejo infectados com MPXV do clado I ou MPXV do clade II usando imunocoloração e hibridização in situ com ácido ribonucleico (RNA).

Sobre o estudo

No presente estudo, os pesquisadores examinaram a infecção por MPXV e sua persistência nos testículos de macacos comedores de caranguejo infectados, incluindo macacos curados com MPXV.

Macacos comedores de caranguejo infectados com MPXV no instituto da equipe foram usados ​​para estudar a patogênese do MPVX humano ou como modelo animal substituto para estudar a varíola. A infecção por MPXV foi detectada pela triagem de tecido testicular, prostático e epididimal fixado em formalina e embebido em parafina (FFPE) de 21 macacos machos comedores de caranguejo que morreram dentro de seis a 13 dias após a exposição ao MPXV através das rotas de inoculação IT, IV ou AS, sem intervenção terapêutica. Isto facilitou a compreensão da possibilidade de infecção por MPXV nos testículos e excreção no sêmen.

A equipe desenvolveu um ensaio de hibridização in situ de RNA (ISH) para identificar o transcrito D1L específico do MPXV, que causa a varíola. O estudo levantou a hipótese de que o MPXV pode permanecer nos testículos dos sobreviventes do NHP. Além disso, foi examinado o tecido testicular de 20 macacos caranguejeiros que resistiram ao desafio do MPXV sem tratamento médico.

Resultados

A equipe observou que 18 dos 21 animais tinham antígeno MPXV em seus testículos, incluindo 14 dos 16 animais com a cepa MPXV do clade I e quatro dos cinco animais com a cepa do clade I. Em sete dos 18 animais, a equipe detectou o antígeno MPXV no epidídimo, enquanto seis dos 21 animais tinham o antígeno MPXV na próstata. Comparado ao tecido testicular de controle não infectado, a coloração do antígeno MPXV foi multifocal e encontrada principalmente no tecido intersticial testicular.

Curiosamente, o antígeno MPXV foi ocasionalmente encontrado em células inflamatórias e espermatozóides ou em restos celulares nos túbulos seminíferos, onde ocorrem tanto a produção de espermatozoides quanto o privilégio imunológico. O antígeno MPXV foi amplamente encontrado no epitélio ductal e na lâmina própria do epidídimo. Notavelmente, o antígeno MPXV também foi encontrado em espermatozoides degenerados, restos celulares no lúmen do ducto epididimal ou células inflamatórias. Nas regiões inflamatórias observadas na próstata de seis dos 21 animais, a coloração imuno-histoquímica (IHQ) foi multifocal ou focal.

A equipe usou anticorpos para realizar coloração de imunofluorescência de alfa-actina do músculo liso (SMA) e MPXV para mostrar que esses MPXVs se espalharam para o lúmen dos ductos epididimais e túbulos seminíferos dos testículos, que são responsáveis ​​pela geração, maturação e transporte de esperma. Estes resultados sugerem que os viriões MPX podem ser libertados no sémen durante a fase aguda da infecção em macacos comedores de caranguejo, embora a verificação adicional exija o isolamento do vírus do sémen.

Dois dos 20 sobreviventes com tecido testicular positivo corado por IHQ sobreviveram até o final do experimento e sua morte planejada. Macacos comedores de caranguejo que sobreviveram à exposição ao MPXV normalmente exibiam lesões cutâneas crostosas com níveis de ácido desoxirribonucléico (DNA) viral abaixo do limiar de detecção aproximadamente 20 dias após a infecção. Esses dois sobreviventes frequentemente apresentavam crostas e feridas cutâneas descascadas ou curadas em seus rostos, caudas, braços, pés e/ou costas.

Os túbulos seminíferos necróticos nos testículos dos dois sobreviventes e a área central necrótica dos granulomas foram os principais locais para detecção de sinais de coloração IHC. Com exceção dos pulmões de um sobrevivente e do linfonodo traqueobrônquico e do músculo esquelético do outro sobrevivente, o sinal de coloração IHC não foi observado nas lesões cutâneas ou em outros órgãos. Além disso, o RNA-ISH específico para MPXV forneceu evidências adicionais de infecção de granulomas testiculares. Além do antígeno viral em grande parte não associado a células no centro necrótico dos granulomas, um pequeno número de monócitos/macrófagos CD68+ próximos às áreas necróticas também continha antígeno viral.

As manchas necróticas também estavam rodeadas por inflamação linfocítica, plasmocítica e neutrofílica, como demonstrado pela abundância de monócitos/macrófagos CD68+, células T CD3+ e neutrófilos mieloperoxidase (MPO)+. Curiosamente, as células T CD8+ constituem a maioria das células T CD3+. Estes resultados sugerem que o MPXV pode persistir, particularmente em áreas de inflamação e necrose, nos testículos de sobreviventes de macacos-caranguejeiros em recuperação.

“Nossos dados fornecem evidências de que o vírus da varíola dos macacos pode ser excretado no fluido seminal tanto nos estágios agudos quanto de convalescença da doença em macacos comedores de caranguejo”.

Diploma

No geral, os resultados do estudo mostraram que os macacos caranguejeiros podem excretar MPXV no sêmen durante os estágios agudo e de convalescença da infecção.

Referência:

• Liu, J., Mucker, EM, Chapman, JL et al. Retrospektiver Nachweis des Affenpockenvirus in den Hoden nichtmenschlicher Primatenüberlebender. Nat Microbiol (2022). doi: https://doi.org/10.1038/s41564-022-01259-w https://www.nature.com/articles/s41564-022-01259-w

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