猴痘病毒感染及其在受感染的食蟹猕猴睾丸中的持续存在

猴痘病毒感染及其在受感染的食蟹猕猴睾丸中的持续存在

在最近发表的一项研究中 天然微生物学 研究人员对非人类灵长类动物（NHP）睾丸中的猴痘病毒（MPXV）进行了回顾性检测。

Lernen: Retrospektiver Nachweis des Affenpockenvirus in den Hoden nichtmenschlicher Primatenüberlebender. Bildnachweis: BalazsSebok/Shutterstock

背景

密切性接触与 2022 年全球大流行中 MPXV 的传播有关。然而，目前尚不清楚 MPXV 是否在睾丸中复制或通过精液传播并导致活动性感染。研究小组使用免疫染色和核糖核酸（RNA）原位杂交技术回顾性检查了感染了进化枝 I MPXV 或进化枝 II MPXV 的食蟹猕猴。

关于该研究

在本研究中，研究人员检查了 MPXV 感染及其在受感染的食蟹猕猴（包括 MPXV 治愈的猕猴）睾丸中的持续性。

该团队的研究所感染了 MPXV 的食蟹猕猴被用来研究人类 MPVX 的发病机制，或作为替代动物模型来研究天花。 MPXV 感染是通过筛查 21 只雄性食蟹猕猴的福尔马林固定、石蜡包埋 (FFPE) 睾丸、前列腺和附睾组织来检测的，这些猕猴通过 IT、IV 或 AS 接种途径在 MPXV 暴露后 6 至 13 天内死亡，无需治疗干预。 这有助于了解睾丸中 MPXV 感染并排泄到精液中的可能性。

该团队开发了一种 RNA 原位杂交 (ISH) 测定法来识别 MPXV 特异性转录本 D1L，它会导致天花。 该研究假设 MPXV 可能残留在 NHP 幸存者的睾丸中。 此外，还对 20 只未经治疗而经受 MPXV 攻击的食蟹猕猴的睾丸组织进行了检查。

结果

研究小组观察到，21 只动物中有 18 只的睾丸中含有 MPXV 抗原，其中 16 只动物中的 14 只携带 MPXV I 型菌株，5 只动物中的 4 只携带 I 型菌株。研究小组在 18 只动物中的 7 只中检测到附睾中的 MPXV 抗原，而 21 只动物中的 6 只在前列腺中检测到 MPXV 抗原。 与未感染的对照睾丸组织相比，MPXV 抗原染色是多灶性的，并且主要存在于睾丸间质组织中。

有趣的是，MPXV 抗原偶尔会在炎症细胞和精子中或生精小管的细胞碎片中发现，而生精小管是精子产生和免疫豁免发生的地方。 MPXV抗原主要存在于附睾的导管上皮和固有层中。 值得注意的是，MPXV 抗原也存在于退化精子、附睾管腔内的细胞碎片或炎症细胞中。 在 21 只动物中的 6 只的前列腺中观察到的炎症区域中，免疫组织化学 (IHC) 染色呈多灶性或局灶性。

研究小组使用抗体对α-平滑肌肌动蛋白（SMA）和MPXV进行免疫荧光染色，结果表明这些MPXV已经扩散到附睾管和睾丸生精小管的管腔中，这些管腔负责精子的产生、成熟和运输。 这些结果表明，在食蟹猕猴感染的急性阶段，MPX 病毒颗粒可能会在精液中释放，尽管额外的验证需要从精液中分离病毒。

20 名睾丸组织经 IHC 染色呈阳性的幸存者中，有两名存活到实验结束并按计划死亡。 在感染 MPXV 后幸存下来的食蟹猕猴通常会在感染后约 20 天出现结痂的皮肤损伤，病毒脱氧核糖核酸 (DNA) 水平低于检测阈值。 这两名幸存者的面部、尾巴、手臂、脚和/或背部经常出现结痂和剥落或愈合的皮肤损伤。

两名幸存者睾丸内坏死的生精小管和坏死的肉芽肿中心区是IHC染色信号检测的主要部位。 除一名幸存者的肺部和另一名幸存者的气管支气管淋巴结和骨骼肌外，皮损及其他器官均未见IHC染色信号。 此外，MPXV 特异性 RNA-ISH 提供了睾丸肉芽肿感染的额外证据。 除了肉芽肿坏死中心的大量非细胞相关病毒抗原外，坏死区域附近的少量CD68+单核细胞/巨噬细胞也含有病毒抗原。

坏死斑块还被淋巴细胞、浆细胞和中性粒细胞炎症包围，如大量 CD68+ 单核细胞/巨噬细胞、CD3+ T 细胞和髓过氧化物酶 (MPO)+ 中性粒细胞所证明。 有趣的是，CD8+ T 细胞占 CD3+ T 细胞的大部分。 这些结果表明，MPXV 可能会持续存在，尤其是在食蟹猕猴幸存者恢复中的睾丸炎症和坏死区域。

“我们的数据提供证据表明，在食蟹猕猴的疾病急性期和恢复期，猴痘病毒都可以分泌到精液中。”

文凭

总体而言，研究结果表明，食蟹猕猴在感染的急性期和恢复期均可在精液中分泌 MPXV。

参考：

• Liu, J., Mucker, EM, Chapman, JL et al. Retrospektiver Nachweis des Affenpockenvirus in den Hoden nichtmenschlicher Primatenüberlebender. Nat Microbiol (2022). doi: https://doi.org/10.1038/s41564-022-01259-w https://www.nature.com/articles/s41564-022-01259-w

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