Le formulazioni disinfettanti per le mani a base alcolica raccomandate dall’OMS mostrano efficacia contro il virus del vaiolo delle scimmie

Le formulazioni disinfettanti per le mani a base alcolica raccomandate dall’OMS mostrano efficacia contro il virus del vaiolo delle scimmie

In uno studio recentemente pubblicato su Malattie infettive emergenti I ricercatori hanno dimostrato l’efficacia di due soluzioni disinfettanti per le mani a base alcolica raccomandate dall’Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) per inattivare il virus del vaiolo delle scimmie (MPXV).

Lernen: Effiziente Inaktivierung des Affenpockenvirus von der Weltgesundheitsorganisation empfohlene Formulierungen und Alkohole zum Einreiben der Hände. Bildnachweis: MIA Studio/Shutterstock

sfondo

È importante adottare misure igieniche per escludere l’assistenza sanitaria e le infezioni virali mortali che causano epidemie. Pertanto, nel 2009, l’OMS ha proposto e introdotto due formulazioni a base alcolica, I e II, per la disinfezione chirurgica e igienica delle mani in ambito sanitario. Tuttavia, i ricercatori non hanno valutato la loro efficacia di inattivazione contro MPVX.

Un fatto preoccupante relativo all’MPXV che lo rende un problema di salute pubblica è che si diffonde tra le persone che non hanno viaggiato in aree endemiche. I suoi modelli clinici ed epidemiologici sono nuovi rispetto alle epidemie precedenti. È anche notevolmente più stabile di altri virus del vaiolo. È quindi necessario confermare quali disinfettanti e biocidi possano effettivamente inattivare MPXV.

Lo studio

Nel presente studio, i ricercatori hanno ottenuto l’isolato virale MPXV-DUS_001 da un paziente a Düsseldorf, in Germania, che era stato infettato all’inizio dell’epidemia di MPXV del 2022. Hanno fatto passare questo isolato due volte su cellule Vero 76 prima dell'uso sperimentale.

Innanzitutto, il team ha coltivato cellule Vero 76 in terreno Dulbecco Modified Eagle (DME) e le ha inoculate a una concentrazione di 0,33 × 106 cellule/ml per la preparazione di MPXV. Successivamente, dopo aver cambiato il mezzo, hanno inoculato queste cellule con MPXV con una molteplicità di infezione (MOI) di 0,01. Il team ha incubato le cellule Vero 76 a 37°C finché non hanno osservato un effetto citopatico visibile (CPE). Hanno proceduto alla raccolta delle cellule infette da MPXV raschiando, quindi agitandole ampiamente nel vortex e quindi estraendo il surnatante infettivo dai detriti cellulari mediante centrifugazione. Infine, i ricercatori hanno aliquotato e titolato le sospensioni del virus secondo protocolli standard e le hanno conservate a -80 °C per un uso futuro. I ricercatori hanno confermato che MPXV-DUS_001 era il clade II di MPXV utilizzando la reazione a catena quantitativa della trascrittasi-polimerasi in tempo reale specifica del panorthopoxvirus (qRT-PCR).

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Il team ha seguito la linea guida europea EN14476 per valutare l'attività virucida delle formulazioni I e II dell'OMS. Poiché queste formulazioni sono a base di 80% di etanolo e 75% di isopropanolo, hanno valutato anche la sensibilità dell'MPXV all'etanolo e al 2-propanolo. Il protocollo prevedeva la miscelazione di otto parti di disinfettante con una parte ciascuna di albumina di siero bovino e MPXV per ottenere una concentrazione finale di 0,3 g/L. La sospensione è stata quindi agitata su vortex e incubata per 30 secondi a temperatura ambiente.

Hanno eseguito un test di diluizione finale su cellule Vero 76 e hanno valutato il CPE al microscopio dopo sette giorni. Successivamente, hanno calcolato la dose infettante del 50% della coltura tissutale (ID50) per millilitro per tutti e quattro i disinfettanti alle concentrazioni finali del 20%, 30%, 40%, 60%. e 80%. Infine, i ricercatori hanno esaminato l’attività virucida delle formulazioni I e II dell’OMS contro l’MPXV in un test in sospensione.

Risultati dello studio

MPXV ha mostrato sensibilità ad entrambe le formulazioni dell’OMS, ma è risultato anche il più stabile tra tutti i virus testati, compreso il vaccino modificato Ankara. Entrambe le formulazioni hanno inattivato in modo efficiente MPXV con fattori di riduzione (RF) >6,7 a concentrazioni del 60% e dell'80% volume/volume (v/v). Sorprendentemente, la Formulazione II dell’OMS è rimasta efficace contro MPXV anche ad una diluizione del 40% (vol/vol) con un RF di 6,6. Al contrario, la formulazione OMS I non è riuscita a ridurre i titoli di MPXV a una concentrazione simile.

I ricercatori hanno scoperto che sia l’etanolo che il 2-propanolo riducevano i titoli di MPXV a livelli di fondo con RF >6,7 a concentrazioni >60% e >40% (v/v), rispettivamente. A RF = 6,6, etanolo al 40% (v/v) ha quasi completamente inattivato MPXV. Tuttavia, a RF = 5,3, il 30% v/v di 2-propanolo ha raggiunto la stessa attività virucida.

Conclusioni

Nel complesso, i risultati dello studio hanno mostrato che MPXV ha mostrato la massima stabilità in entrambe le formulazioni dell’OMS rispetto ad altri virus (ri)emersi della famiglia Orthopox. L'MPXV infettivo persiste nell'ambiente domestico per più di 15 giorni. A causa dello stretto legame con le matrici di fibrina del materiale escarico, i virioni rilasciati dalle lesioni sono ancora più resistenti all'essiccamento rispetto ad altri virus con involucro (ad esempio, il virus dell'influenza). L’elevata stabilità di MPXV richiede una rivalutazione completa delle attuali misure igieniche. Fortunatamente, entrambe le formulazioni dell’OMS hanno testato efficacemente l’MPXV inattivato, supportandone l’uso nei sistemi sanitari e durante le epidemie di MPXV. In conclusione, lo studio ha dimostrato che l’applicazione tempestiva di disinfettanti a base alcolica potrebbe ridurre efficacemente al minimo la diffusione di MPXV durante l’epidemia in corso di MPVX.

Riferimento:

• Meister TL, Tao R, Brüggemann Y, Todt D, Steinmann J, Timm J, et al. (2022). Effiziente Inaktivierung des Affenpockenvirus durch von der Weltgesundheitsorganisation empfohlene Händedesinfektionsformulierungen und Alkohole. Neu auftretende Infektionskrankheiten. doi: https://doi.org/10.3201/eid2901.221429 https://wwwnc.cdc.gov/eid/article/29/1/22-1429_article

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