يقوم الباحثون بتطوير مقايسة للتقييم النوعي لتحييد الأجسام المضادة لـ SARS-CoV-2

يقوم الباحثون بتطوير مقايسة للتقييم النوعي لتحييد الأجسام المضادة لـ SARS-CoV-2

كان الاختبار المكثف لعدوى فيروس كورونا 2 (SARS-CoV-2) المسبب لمتلازمة الجهاز التنفسي الحادة بمثابة إجراء احتواء أولي لاحتواء الوباء المستمر. وتسبب العدوى مرض فيروس كورونا 2019 (COVID-19)، الذي أودى حتى الآن بحياة أكثر من 2.7 مليون شخص في جميع أنحاء العالم. إن الحاجة إلى حلول علاجية فعالة كبيرة، وذلك أيضًا في ضوء برامج التطعيم المستمرة ضد فيروس سارس-كوف-2 في أجزاء كثيرة من العالم. أحد هذه الأساليب العلاجية المعتمدة على البلازما هو استخدام الأجسام المضادة المعادلة من دم المرضى المتعافين.

لتلبية الحاجة إلى اختبار تحييد عالي الجودة ضد SARS-CoV-2، قام الباحثون في المعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية (NIAID) بتعديل وتحسين اختبار تحييد تقليل التألق (FRNA) الذي تم إنشاؤه مسبقًا لتمكين التقييم النوعي لعدد كبير من الخلايا المصابة من خلال استخدام نظام تصوير عالي المحتوى.

في هذه الدراسة، وصف الفريق اختبار تحييد كمي شبه عالي الإنتاجية لـ SARS-CoV-2 استنادًا إلى نظام التصوير عالي المحتوى Operetta. ادعى المؤلفون أن الأجهزة المماثلة (التي قد لا تكون متاحة في العديد من البيئات المختبرية) يمكن أن تكون فعالة بنفس القدر مع التحقق المناسب.

وأفادوا أنه اعتبارًا من فبراير 2021، تم استخدام SARS-CoV-2 FRNA لفحص أكثر من 5000 عينة، بما في ذلك عينات البلازما أو المصل الحادة والنقاهة وعلاجات الأجسام المضادة العلاجية، لتحييد عيار SARS-CoV-2.

"على الرغم من أنه سيكون هناك دائمًا تباين في فحوصات الفيروسات الحية بسبب طبيعة النظام البيولوجي، فإن استخدام نهج إحصائي صارم لإبلاغ قبول البيانات يمكن أن يخفف من الآثار السلبية المحتملة لضعف كفاءة العدوى، وأخطاء سحب العينة، وتأثيرات الحافة، والتلطيخ غير المتناسق."

كوفيد-19 هو مرض غير متجانس يظهر غالبًا في صورة أمراض الجهاز التنفسي الحادة وأمراض القلب والأوعية الدموية والأمراض العصبية. أثناء المرض الحاد، يحدث تغير سريع في فئة الأجسام المضادة من الغلوبولين المناعي M (IgM) إلى IgG وIgA. لاحظ الباحثون أن النمط النظري للجسم المضاد لا يقل أهمية في السيطرة على المرض مثل البروتين المستهدف الفيروسي.

ولاحظ الباحثون أن شدة المرض ترتبط باستجابات الأجسام المضادة الأكثر قوة والأطول أمدا للبروتين النووي الفيروسي (N). ولذلك، يُعتقد أن وجود الأجسام المضادة لـ SARS-CoV-2 في الدم يعد مقياسًا جيدًا للمناعة الوقائية للقاح المرشح. وهذا يتطلب أساليب سريعة وموثوقة وحساسة للكشف عن الأجسام المضادة المعادلة لـ SARS-CoV-2.

تلطيخ المناعي للخلايا المصابة بفيروس SARS-CoV-2.أ. الخلايا غير المصابة ملطخة بصبغة هويشت النووية (الأزرق). ب. الخلايا المصابة بفيروس SARS-CoV-2 وتم فحصها باستخدام جسم مضاد خاص ببروتين SARS-CoV N وجسم مضاد ثانوي Alexa594 (أحمر). تمت مقاومة الخلايا باستخدام صبغة هويشت النووية (الأزرق).

كانت هذه المقالة الإخبارية عبارة عن مراجعة لتقرير علمي أولي لم تتم مراجعته من قبل النظراء في وقت النشر. منذ نشره الأولي، تم الآن مراجعة التقرير العلمي من قبل النظراء وتم قبوله للنشر في مجلة أكاديمية. يمكن العثور على روابط للتقارير الأولية والمراجعة من قبل النظراء في قسم المصادر في نهاية هذه المقالة.عرض المصادر

يعد FRNA اختبارًا محددًا وقابل للقياس وصارمًا للغاية لتقييم الأجسام المضادة المعادلة في عينة الاختبار. يحدد الفحص الخلايا الفردية المصابة بالإضافة الأولية للفيروس ولا يتطلب جولات متعددة من تكرار الفيروس.

وباعتباره اختبارًا غير نمطي، فهو لا يعتمد على التحديد الذاتي لتأثيرات الاعتلال الخلوي للخلايا ولا على تطور لويحات متعددة الخلايا أو بؤر مناعية باستخدام أعداد صغيرة من الجزيئات المعدية لكل بئر. قام الباحثون بفحص مراقبة الفيروسات وملاحظات التحكم في الخلايا للقيم المتطرفة وقاموا بتقييم تباين وخصوصية الاختبار.

نظرًا لأن الاختبار يستخدم مخططات تخفيف مكونة من 12 خطوة وتحليل لوجستي من أربعة معلمات لتحديد NT50 محدد، فإنه يسمح بفهم أكثر دقة لقدرة التحييد، خاصة في حالة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة أو الأجسام النانوية.

في هذه الدراسة، وصف الباحثون تطوير اختبار تحييد SARS-CoV-2 شبه عالي الإنتاجية الذي يعزز قدرات نظام التصوير عالي المحتوى لتحديد عدد الخلايا المصابة في الآبار الفردية. والأهم من ذلك، أظهر الباحثون أنه يمكن تكييف الاختبار بسرعة للاستخدام مع متغيرات فيروسات متعددة. تساعد مثل هذه الاختبارات بشكل كبير وتسرع دراسات اللقاحات قبل السريرية والتجارب السريرية.

خلال أزمة كوفيد-19، وافقت إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) مبدئيًا على برنامج الوصول الموسع (EAP) لعلاج مرضى كوفيد-19 بالبلازما من أفراد لديهم عيار تحييد يبلغ 1:160 أو أعلى. وقد عالج هذا البرنامج أكثر من 94000 مريض في جميع أنحاء الولايات المتحدة. في أغسطس الماضي، أصدرت إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) ترخيصًا للاستخدام في حالات الطوارئ (EUA) للسماح بالعلاج بالبلازما العلاجية لمرضى كوفيد-19 خارج التجارب السريرية.

ويدعي الباحثون أن هذا الاختبار لا يتطلب تفسيرًا ذاتيًا، وبالتالي فهو أكثر دقة من معظم الاختبارات الأخرى لتحييد الفيروسات من النوع البري.

"على الرغم من أنه سيكون هناك دائمًا تباين في فحوصات الفيروسات الحية بسبب طبيعة النظام البيولوجي، فإن استخدام نهج إحصائي صارم لإبلاغ قبول البيانات يمكن أن يخفف من الآثار السلبية المحتملة لضعف كفاءة العدوى، وأخطاء المسح، وتأثيرات الحافة، وبقع عدم الاتساق."

كانت هذه المقالة الإخبارية عبارة عن مراجعة لتقرير علمي أولي لم تتم مراجعته من قبل النظراء في وقت النشر. منذ نشره الأولي، تم الآن مراجعة التقرير العلمي من قبل النظراء وتم قبوله للنشر في مجلة أكاديمية. يمكن العثور على روابط للتقارير الأولية والمراجعة من قبل النظراء في قسم المصادر في نهاية هذه المقالة.عرض المصادر

مراجعات المادة

• 5. April 2023 – Die vorab gedruckte vorläufige Forschungsarbeit, auf der dieser Artikel basiert, wurde zur Veröffentlichung in einer von Experten begutachteten wissenschaftlichen Zeitschrift angenommen. Dieser Artikel wurde entsprechend bearbeitet und enthält nun einen Link zum endgültigen, von Experten begutachteten Artikel, der jetzt im Abschnitt „Quellen“ angezeigt wird.

مصادر: