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研究人员开发了中和 SARS-CoV-2 抗体的定性评估方法
“开发了新的 SARS-CoV-2 中和测试：研究人员能够对对抗 COVID-19 的抗体进行定性评估。在此处了解更多信息。”
研究人员开发了中和 SARS-CoV-2 抗体的定性评估方法
对严重急性呼吸综合征冠状病毒 2 (SARS-CoV-2) 感染的广泛检测是遏制当前大流行的主要遏制措施。 这种感染会导致 2019 年冠状病毒病 (COVID-19)，迄今为止已在全球夺去了超过 270 万人的生命。 鉴于世界许多地区正在进行的针对 SARS-CoV-2 的疫苗接种计划，对有效治疗解决方案的需求非常大。 一种基于血浆的治疗方法是使用恢复期患者血液中的中和抗体。
为了满足针对 SARS-CoV-2 的高质量中和测试的需求，美国国家过敏和传染病研究所 (NIAID) 的研究人员修改并优化了之前建立的荧光还原中和 (FRNA) 测试，以便通过使用高内涵成像系统对大量受感染细胞进行定性评估。
在这项研究中，研究小组描述了一种基于 Operetta 高内涵成像系统的 SARS-CoV-2 半高通量、高定量中和测定方法。 作者声称，通过适当的验证，类似的设备（在许多实验室环境中可能无法使用）可以同样有效。
他们报告称，截至 2021 年 2 月，SARS-CoV-2 FRNA 已用于筛查 5,000 多个样本，包括急性和恢复期血浆或血清样本以及治疗性抗体治疗，以检测 SARS-CoV-2 中和滴度。
“虽然由于生物系统的性质，活病毒检测总是存在差异，但使用严格的统计方法来告知数据可接受性可以减轻感染效率差、移液错误、边缘效应和不一致染色的潜在负面影响。”
COVID-19是一种异质性疾病，常表现为严重的呼吸道疾病、心血管疾病和神经系统疾病。 在急性疾病期间，抗体类别从免疫球蛋白 M (IgM) 快速变化为 IgG 和 IgA。 研究人员指出，抗体同种型在控制疾病方面与病毒靶蛋白一样重要。
研究人员观察到，疾病的严重程度与对病毒核蛋白（N）的更强烈和更持久的抗体反应有关。 因此，血液中抗 SARS-CoV-2 抗体的存在被认为是候选疫苗保护性免疫力的良好衡量标准。 这需要可靠且灵敏的快速方法来检测 SARS-CoV-2 中和抗体。
SARS-CoV-2 感染细胞的免疫荧光染色。A. 未感染的细胞用 Hoechst 核染色剂（蓝色）染色。 B. 感染 SARS-CoV-2 并使用 SARS-CoV N 蛋白特异性抗体和 Alexa594 二抗（红色）进行检查的细胞。 用 Hoechst 核染色剂（蓝色）对细胞进行复染色。
这篇新闻文章是对初步科学报告的评论，该报告在发表时尚未经过同行评审。 自首次发表以来，该科学报告现已经过同行评审并接受在学术期刊上发表。 初步报告和同行评审报告的链接可以在本文末尾的“来源”部分找到。查看来源
FRNA 是一种高度特异性、可量化且严格的测试，用于评估测试样品中的中和抗体。 该测定可对最初添加的病毒感染的单个细胞进行定量，并且不需要多轮病毒复制。
作为一种非典型测试，它不依赖于细胞病变效应的主观确定，也不依赖于每孔使用少量感染性颗粒形成多细胞斑块或免疫灶。 研究人员检查了病毒对照和细胞对照观察结果中的异常值，并评估了测定的变异性和特异性。
由于该测定使用 12 步稀释方案和四参数逻辑分析来量化特定的 NT50，因此可以更精确地了解中和能力，特别是在单克隆抗体或纳米抗体的情况下。
在这项研究中，研究人员描述了半高通量 SARS-CoV-2 中和测定的开发，该测定利用高内涵成像系统的功能来量化单个孔中受感染细胞的数量。 重要的是，研究人员表明该测试可以快速适应多种病毒变种。 此类测试极大地有助于并加速临床前疫苗研究和临床试验。
在 COVID-19 危机期间，美国食品和药物管理局 (FDA) 最初批准了一项扩展准入计划 (EAP)，使用中和滴度为 1:160 或更高的个体的血浆治疗 COVID-19 患者。 该计划已治疗了全美超过 94,000 名患者。去年 8 月，FDA 发布了紧急使用授权 (EUA)，允许在临床试验之外对 COVID-19 患者进行治疗性血浆治疗。
研究人员声称，该测试不需要主观解释，因此比大多数其他中和野生型病毒的测试更精确。
“尽管由于生物系统的性质，活病毒检测总是存在差异，但使用严格的统计方法来告知数据接受可以减轻感染效率差、移液错误、边缘效应和不一致染色的潜在负面影响。”
这篇新闻文章是对初步科学报告的评论，该报告在发表时尚未经过同行评审。 自首次发表以来，该科学报告现已经过同行评审并接受在学术期刊上发表。 初步报告和同行评审报告的链接可以在本文末尾的“来源”部分找到。查看来源
文章修改
- 5. April 2023 – Die vorab gedruckte vorläufige Forschungsarbeit, auf der dieser Artikel basiert, wurde zur Veröffentlichung in einer von Experten begutachteten wissenschaftlichen Zeitschrift angenommen. Dieser Artikel wurde entsprechend bearbeitet und enthält nun einen Link zum endgültigen, von Experten begutachteten Artikel, der jetzt im Abschnitt „Quellen“ angezeigt wird.
资料来源：
- Preliminary scientific report.
Richard S. Bennett, Elena N. Postnikova, Janie Liang, Robin Gross, Steven Mazur, Saurabh Dixit, Vladimir V. Lukin, Greg Kocher, Shuiqing Yu, Shalamar Georgia-Clark, Dawn Gerhardt, Yingyun Cai, Lindsay Marron, Michael R. Holbrook (2021) Scalable, Micro-Neutralization Assay for Qualitative Assessment of SARS-CoV-2 (COVID-19) Virus-Neutralizing Antibodies in Human Clinical Samples. bioRxiv 2021.03.05.434152; doi: https://doi.org/10.1101/2021.03.05.434152, https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2021.03.05.434152v1 - Peer reviewed and published scientific report.
Bennett, Richard S., Elena N. Postnikova, Janie Liang, Robin Gross, Steven Mazur, Saurabh Dixit, Gregory Kocher, et al. 2021. “Scalable, Micro-Neutralization Assay for Assessment of SARS-CoV-2 (COVID-19) Virus-Neutralizing Antibodies in Human Clinical Samples.” Viruses 13 (5): 893. https://doi.org/10.3390/v13050893. https://www.mdpi.com/1999-4915/13/5/893.